小鼠D-乳酸脫氫酶（D-LDH）ELISA試劑盒檢測(cè)方法

-小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒

Mouse D-LDH ELISA Kit

Product Introduction

中文名稱：小鼠D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒

英文簡(jiǎn)稱：Mouse D-LDH ELISA Kit

規(guī)格：48T/96T

檢測(cè)范圍：1.5 U/L – 48 U/L

zui低檢測(cè)限：0.1 U/L

檢測(cè)方法：雙抗夾心法

檢測(cè)樣本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、組織勻漿及相關(guān)生物液體

需自備的設(shè)備及試劑：                               

1.450±10nm濾光片酶標(biāo)儀（建議儀器使用前預(yù)熱）

2.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL.

3.Eppendorf 移液器.

4.蒸餾水或去離子水.

5.脫脂棉吸水紙.

6.37℃恒溫箱.

7.100ml和1000ml量筒.

8.準(zhǔn)備若干個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管.

試劑盒的儲(chǔ)存及有效期：                              

未開(kāi)封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意，收到試劑盒后請(qǐng)盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。

使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。

實(shí)驗(yàn)原理：                                     

將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本，其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入微生物化的目標(biāo)抗體，將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后，加入HRP標(biāo)記和親和素，再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（O.D.值），計(jì)算樣品濃度。

精密度：                                       

精密度用樣品測(cè)定值的變異系數(shù)CV表示。CV（%）=SD/mean×100

批內(nèi)差：取同批次試劑盒對(duì)低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測(cè)，每份樣本連續(xù)測(cè)定20次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批間差：選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對(duì)低、中、高值定值樣本定量測(cè)定，每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復(fù)測(cè)定8次，分別計(jì)算不同濃度樣本的平均值及SD值。

批內(nèi)差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%

穩(wěn)定性：                                       

經(jīng)測(cè)定，試劑盒在有效期內(nèi)按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。

為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響，實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。

友情提醒：                                         

試劑盒使用完畢后，請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材，避免環(huán)境污染！